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超高效液相色谱-串联四极杆质谱法分析婴儿乳粉中的唾液酸

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       唾液酸(sialic acid,SA)是指一系列含9个碳原子的羧基化单糖酰化衍生物的统称,化学命名为5一氨基-3,5.二脱氧一D-甘油一D一半乳壬酮糖。人乳(human milk)中部分低聚糖的末端黏附有高浓度的唾液酸,参与人脑组织中神经节苷脂和糖蛋白的构成,有助于增强神经突触发生和促进神经系统发育¨’2I。所有哺乳动物(包括人)的肝脏都具有由单糖合成唾液酸的能力,但是人类新出生婴儿的这种能力相对不成熟,满足不了神经系统快速生长发育的需要¨’⋯。在人乳和婴儿配方乳中,它分别以游离、低聚糖结合和蛋白质结合的形式存在;人乳低聚糖结合唾液酸约占73%,婴儿配方乳蛋白结合唾液酸约占70%,所结合的唾液酸主要是Ⅳ一乙酰神经氨酸(N-acetylneuraminic acid,Neu5Ac);通常所指的唾液酸即指Neu5Ac’5 o(结构见图1)。牛乳和婴儿配方乳中唾液酸含量都很低¨’⋯。目前,国内市场已有婴儿配方乳添加唾液酸,使其更接近人乳含量。随着添加唾液酸食品的增加,食品质量监督部门与生产企业质量控制需要也不断增多,势必要求更加准确和快速的检测方法。

    用于唾液酸分析的方法很多,如酶反应、抗体、凝集素以及病毒等已经用于确定总唾液酸含量或检测特定类型的唾液酸;苔黑酚、间苯二酚、硫代巴比妥酸比色法和分光光度法多年来也已广泛应用于唾液酸的检测"’⋯。这些方法的共同局限是它们无法区分唾液酸的类型并且要求样品净化。而比色法和色谱光度测定法等传统方法则是用离子交换柱纯化酸水解样品后的唾液酸,采用这种方法时样品中的唾液酸损失较大,影响检测的准确性。关于食品中唾液酸的检测方法有高效液相色谱法(HPLC),采用HPLC对人乳中Neu5Ac的检出限为0.02¨mol/Lp。,对婴儿配方乳中Neu5Ac的检出限为0.03 mg/L‘1 0’“o。这些方法都较为灵敏。但因为大多数的糖类化合物没有发色基团,唾液酸也不例外,所以采用HPLC分析需要对唾液酸进行衍生后测定,因而增加了实验的复杂性和可能的干扰因素。虽然也有报道采用HPLC-MS/MS分析奶粉中唾液酸含量的检出限为0.06 mg/L 012],但缺乏系统性和实用性。还有对其他生物样品中唾液酸进行分析的报道,但这些方法也不适用于乳粉中唾液酸的分析。

 

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作者:admin 来源:网络收集 发布时间:2017年02月14日