摘要: 对食用油DNA 提取方法、样品基质和食用油加工工艺对食用油DNA 提取的影响进行了系统阐述; 综述了检测基因、分光光度法、荧光光谱法、定性PCR、实时定量PCR 和分子标记技术在食用油DNA 检测中的应用现状; 讨论了食用油DNA 提取和检测中存在的问题及未来的发展前景。
关键词: 食用油，DNA 提取方法，样品基质，加工工艺，检测技术
现在市场上的精炼植物油主要有大豆油、玉米油、花生油、葵花油、橄榄油、菜籽油和芝麻油等及其调和油，其主要成分为甘油三酸脂，提供了人体自身无法合成的必需脂肪酸，如亚油酸、α－ 亚麻酸等，及各种脂溶性维生素A、D、E、K 等。各种食用油的营养价值不同，其中以橄榄油最佳，其不饱和脂肪酸高达82%～87%，油酸、亚油酸、亚麻油酸含量的比例是最适合人体需要的比例［1］。随着科技的进步和人们健康意识的增强，人们更加关注食品的质量和安全。转基因的检测是人们对于食品质量与安全关注的重点之一，最主要的转基因作物是大豆，2010 年大豆的种植面积占全世界油料作物种植面积的58%［2］。大豆油是主要的食用油之一，在美国大豆提供的食用油脂占所有油脂的68%［2］，中国转基因大豆进口量逐年增加，目前中国市场上70% 的大豆制品含有转基因成分［3］; 另外，人们在食用油方面关注的问题是食用油掺假问题，由于不同食用油营养价值不同，价格差异很大，有些不法厂商为了追逐高利润，向高价食用油中添加低价食用油，严重损害了消费者的利益。最常用检测转基因的方法是基于DNA 的检测技术( 如PCR) ，基于蛋白质的检测技术并不适用于分析检测深加工食品。食用油掺假检测主要有理化检测方法、气相色谱法、近红外光谱技术、高效液相色谱法及同位素比值法［3］或质子转移反应质谱( PTR－MS) 、核磁共振光谱( NMR) ［4］等方法。虽然每种食用油化学组成不同，但化学分析方法分析食用油的起源和真实性并没有固定的指标，且其检测限不够低( ≥5%) ［4－5］，所以化学分析方法并不能满足食用油真实性的检测。基于DNA 的检测技术检测线高且能更好的反应原料的真实性，所以分子手段更适合食用油掺假的检测，近几年，应用分子手段检测食用油掺假问题的研究主要在橄榄油方面［6］。本文对食用油DNA 提取及检测技术进行了详细综述。
1 食用油DNA 的提取方法及其主要影响
因素
1.1 DNA 提取方法
目前，关于食用油DNA 提取方法的研究有很多，其中橄榄油研究的比较多，其次是大豆油，其他植物食用油研究的比较少。应用于食用油的DNA提取的方法有很多种，主要有试剂盒法、乳化法和冷冻干燥法。
DNA 提取的第一步是样品的制备，提取食用油383DNA 有两种样品制备方法，一是食用油直接作为样品，如果是市售食用油可以直接作为样品，因为其已经是具有代表性的均一样品; 如果是实验室自制食用油或者食用油半成品则需要先把整个样品振荡混匀，再取适量用于DNA 提取。另一种是先离心食用油，以得到的沉淀为样品，但市售食用油已经过离心等加工过程，所以离心几乎不能从市售食用油中得到沉淀。
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相关标准： GB 1534-1986 花生油
GB 2760-2014 食品安全国家标准 食品添加剂使用标准