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GBT 39729-2020 细胞纯度测定通用要求 流式细胞测定法.pdf5.2.4温度控制装置
用于细胞染色的孵育温度控制或试剂、样本的保存,例如冰箱。使用者应监测并记录温度控制装置
GB/T 33103-2016 氧化铝型硫磺回收催化剂活性试验方法的温度准确性和稳定性
GB/T39729—2020
根据原始样本的类型选择合适的待测 本制备方式。待测样本应是单分散细胞悬液,即待测 的细胞以单个细胞存在,没有细胞团或细胞碎片
运送条件不应影响待测细胞的生物特性和检测结
待测样本应具有标签,标签上注明样本类型、样本采集和制备的时间和地
细胞染色前,应根据流式细胞仪的性能参数、待测细胞的黏附、目然沉降等特性来调整样本中的细 抱浓度。 如果细胞浓度过高,可用缓冲溶液对待测样本进行稀释,并记录稀释倍数, 根据荧光染料或特异性的荧光染料标记抗体质量参数确定样本量及染料、抗体浓度、孵育条件。 保证待测样本和荧光染料或特异性的荧光染料标记抗体充分混合,应选择合适的涡旋转速和时长 转速过高或时间过长会造成细胞破损。 待测样本完成细胞染色后,应尽快进行上机检测。如果无法尽快上机检测,应通过固定剂进行固定 并适当条件保存,宜4℃8℃避光保存
应根据流式细胞仪的仪器说明书设置仪器的工作条件,包括环境温度、湿度、电源电压、大气压 境光照等
荧光通道的平均荧光强度、变异系数和荧光分辨率
5.4.3细胞纯度的测量
5.4.3.1设置对照
应设置阴性对照、阳性对照、同型对照、荧光扣除对照,用于识别目标细胞并确认目标细胞的染色方 案是否正确。 使用不含任何荧光染料的待测细胞样本作为阴性对照 使用已经证明可有效地与待测荧光染料结合的细胞样本作为阳性对照, 使用与荧光染料标记的抗体相同种属来源、同种免疫球蛋白的相同亚型的相同剂量抗体染色的细 孢样品作为同型对照。 使用两个和两个以上的荧光染料或荧光染料标记抗体组合标记细胞样本时,在完整的染色基础上
5.4.3.5且标细胞设门
GB/T39729—2020
,通过相应散点图中的荧光强度表达,从阳性对照的荧 中区分出目标细胞的阳性信号并进行设门
QSDSDL 0001S-2015 山东三顿粮农产品有限公司 谷物粥料5.4.3.6信号采集
应在进样稳定后开始采集信号。 总细胞信号采集数量不应小于10000,目标细胞信号采集数量不应小于1000个。若总细胞信号 采集数量为10000时,不能获取1000个目标细胞采集数量,可加大总细胞信号采集数量。 信号采集时间应保持在合理范围内,过长时间可能导致细胞发生聚集或沉降
按照公式(1)计算目标细胞纯度
式中: P——目标细胞纯度; N.——目标细胞数量,单位为个; N.—总细胞数量,单位为个。
式中: P——目标细胞纯度; N。目标细胞数量YY/T 0516-2009 牙科EDTA根管润滑 清洗剂,单位为个; N.—总细胞数量,单位为个。
应对具体测量方法进行方法性能确认 方法性能参数包括准确度、精密度、工作范围(检出限、线性 范围等)、特异性、方法稳健性和组间精密度(如操作者间、仪器间和日间变化)等。 可建立评估方法性能参数的方案和标准,制定并保存相应的文件。
报告提供的信息应至少包括: 使用仪器信息,包括仪器的参数设定; b) 试剂名称、来源、批号; c) 测量结果: d) 数据分析程序; e)意外情况。