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谷物淀粉含量的测定(旋光法)

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酸性氯化钙溶液与磨细的含淀粉样品共煮,可使淀粉轻度水解。同时钙离子与淀粉分子上的羟基络合,这就使得淀粉分子充实地分手到溶液中,成为淀粉溶液。淀粉分子具有差池称碳原子,因而具有旋光性,可以操作旋光仪测定淀粉溶胶的旋光度(α),旋光度的巨细与淀粉的浓度成正比,据此可以求出淀粉含量。溶提淀粉溶胶所用的酸性氯化钙溶液的pH值必需保持2.30,密度须为1.30,加时刻的黑白也要节制在必然范畴。由于只有在这些前提下,各类差异来历的淀粉溶液的比旋度[α]才都是203°,恒定稳固。样品中其他旋光性物质(如糖分)须预先撤除。

首要试剂

乙醚、氯化高汞、乙醇、醋酸-氯化钙、30%ZnSO4、15%K4Fe(CN)。

首要装备

离心机、天平、旋光仪、250ml三角瓶、漏斗、离心管、小电炉。

尝试步调

1. 样品筹备

   1)称取样品:准确称取约2.5g样品细粉(要求含淀粉约2g),置于离心管内。

   2)脱脂:加乙醚数ml到离心管内,用细玻棒充实搅拌,然后离心。倾出上清液并网络以备接纳乙醚。一再脱脂数次,以去除大部门油脂、色素等(因油脂的的存在会使往后淀粉溶液的过滤坚苦)。大大都谷物样品含脂肪较少,可免除这个脱脂手续。

   3)克制酶活性:加含有氯化高汞的溶液10ml到离心管内,充实搅拌,然后离心,倾去上清液,获得残余物。

   4)脱糖:加80%乙醇10ml到离心管中,充实搅拌以洗涤残余物(每次都用统一玻棒),离心,倾去下清液。一再洗涤数次以去除可溶性糖分。

2. 溶提淀粉

   1)加醋酸-氯化钙:先用醋酸氯化钙溶液约10ml加到离心管中,搅拌后所有倾入250ml三角瓶内,再用醋酸氯化钙溶液50ml分数次洗涤离心管,洗涤液并入三角瓶内,搅拌玻棒也转移到三角瓶内。

   2)煮沸消融:先用蜡笔标志液面高度,直接置于加有石棉网的小电炉上,在4min~5min内敏捷煮沸,保持沸腾15min~17min,当即将三角瓶取下,置流水中冷却。煮沸进程中要时加搅拌,勿令烧焦;要调理温度,勿使泡沫涌出瓶外;常用玻璃将瓶侧的细粒擦下;并加水保持液面高度。

3. 沉淀杂质和定容:

   1)加沉淀剂:将三角瓶内的水解液转入100ml容量瓶,饲料检测,用醋酸氯化钙溶液充实洗涤三角瓶瓶,并入容量瓶内,加30%ZnSO41ml殽杂后,再加15%K4Fe(CN)61ml,用水稀释至靠近刻度时,加95%乙醇一滴以粉碎泡沫,然后稀释到刻度,充实殽杂,静置,以使卵白充实沉淀。

   2)滤清:用漏斗(加一层滤纸)过滤。先倾清溶液约10ml于此滤纸上,使其完全潮湿,让溶液流干,弃去滤液,再倾清溶液举办过滤,用干燥的容器接管此滤液,网络约50ml,即可供测定之用。

4. 测定旋光度:用旋光测定管装满滤液,警惕地凭证旋光仪行使声名,举办旋光度的测定。

5. 功效计较

淀粉(%)=α×N×100/{[α]20D×L×(W-K)}×100

式中:α:用钠光时视察到的旋光度;[α]20 D:淀粉的比旋度,在这种要领前提下为203°;L:旋光管长度(dm);W:样品格量(g);K:样品水分含量(g);N:稀释倍数;100:换算为百分率。也可以不消上列公式计较,改用事变曲线来求得淀粉含量,这样精确度高些。


作者:admin 来源:网络收集 发布时间:2016年06月26日
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