酿酒酵母感觉态细胞的制备
(1)从YPD平板上挑取一个奇怪的酿酒酵母EBY100单克隆至10 mlYPD液体作育基，30℃，250 rpm作育留宿；
(2)测定留宿作育物的OD600值为3.0～5.0之间；
(3)将10 ml YPD留宿作育物稀释至OD600值为0.2～0.4；
(4)在28～30℃摇床中继承作育3～6hr，使其OD600值到达0.6～1.0；
(5)于室温1500g离心5 min网络酵母细胞，弃上清；
用10ml洗液洗酵母细胞，随后于室温1500g离心5 min离心网络细胞，弃上清；
(7)用1 ml TE/LiAc重悬酵母细胞，以每管50μl分装。
酿酒酵母细胞的转化
(1)取50μl感觉态细胞，再插手待转质粒各2μl，混匀；
(2)插手500μl 转化用溶液（PEG/LiAc二甲亚砜），弹击管壁混匀；
(3)30℃水浴1hr隔15min弹击管壁混匀；
(4)插手1毫升YPD作育液，30℃摇床作育1小时
(5)3500g离心5 min ，留沉淀，弃上清；
沉淀用150μl TE重悬，涂响应的SD平板；将平板倒置于30℃作育。
相关标准：
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