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测定茶叶中多种有机锡化合物残留

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        在线凝胶渗出色谱-气相色谱-质谱法测定茶叶中多种有机锡化合物残留
  有机锡化合物(OTCs)是一类包括C-Sn共价健的化合物,首要用于聚氯乙烯聚合物的不变剂、化学回响中的催化剂及农业出产中的除草剂、灭菌剂和杀虫剂[1]。因为有机锡化合物在工农业出产中的普及应用,造成其在情形中的广泛污染,并沿着食品链的不绝转达而对人体康健造成影响。作为一种重要的内渗透滋扰物质[2],浓度在ng/L程度的有机锡化合物即可对水情形中的生物发生毒性危害[2,3]。因此,有机锡化合物的痕量与超痕量说明是当今情形和食物安详说明规模的重要研究课题。
  本文回收在线凝胶色谱串联气相色谱-质谱(GPC-GC-MS)技能,团结概略积进样,同时检测茶叶中的6种有机锡化合物,具有检出限低、快速、轻盈、一再性好等利益及较好的现实应用代价。
  1. 尝试部门
  1.1 仪器与试剂
  GPC-GC/MS QP 2010
  Plus在线凝胶渗出色谱-气相色谱质谱联用仪(日本岛津公司),配有措施升温(PTV)进样口和EI电离源;Envi-Carb活性碳固相萃取小柱(250 mg,3mL,Supelco公司);Florisil固相萃取小柱(250 mg,3mL,Supelco公司);快速混匀器(SK-1型,常州澳华仪器有限公司);氮吹仪(KL 5121型);低速离心机(10000 rpm以下,TDZ4-WS型);电子阐来日诰日平(PB203-N型)。丙酮、环己烷和正己烷均为HPLC级试剂;无水乙醚、H2SO4为说明纯;无水Na2SO4为说明纯,650℃灼烧4 h,贮于密封干燥器中备用。所用水均为超纯水。
  六种尺度品:二丁基二氯化锡(DBT)、三丁基氯化锡(TBT)、二苯基二氯化锡(DPhT)、三苯基氯化锡(TPhT)、三唑锡(Azocyclotin)和苯丁锡(FBTO)购自Dr.S. Ehernstorfer公司,纯度均大于95%。正戊基溴化镁(2.0 mol/L乙醚溶液),购自Aldrich公司。
  1.2 色谱质谱前提
  GPC前提:Shodex CLNpak EV-200凝胶色谱柱,150 mm×2.1mm(i.d.);活动相为丙酮-环己烷(3:7,V/V);流速:0.1 mL/min;柱温:40℃;进样量:10μL。GPC的淋出液网络时刻为4.14~5.74 min。
  GC-MS前提:惰性熔融石英毛细管柱色谱,5 m×0.53 mm(i.d.);DB-5MS预柱,5 m×0.25 mm(i.d.)×0.25μm(膜厚);DB-5MS说明柱(25 m×0.25 mm(i.d.)×0.25 μm(膜厚)。
  PTV进样模式:进样口初始温度120℃,保持5 min,以100℃/min措施升温至250℃,保持23.7 min。
  色谱柱升温措施:色谱柱起始温度82℃,保持5 min,以20℃/min措施升温至250℃,保持5 min,再以30℃/min措施升温至310℃,保持10min;载气:He气,纯度大于便是99.999%,流速为1.0 mL/min;电子轰击源(EI),70eV;离子源温度:250℃;接口温度:280℃;扫描方法:选择离子监测模式(SIM)。
  1.3 尺度溶液的配制
  别离称取100 mg(准确至0.1 mg) 各有机锡尺度物于100 mL 容量瓶中,用甲醇消融并定容,得1 .000mg/mL有机锡尺度溶液,于暗中处4℃蕴藏,行使前用甲醇稀释成恰当浓度的殽杂尺度溶液。
  1.4 样品前处理赏罚
  称取0.5 g毁坏的茶叶样品于10 mL玻璃试管中,插手1 mL盐酸溶液(1 mol/L),混匀后插手1 mL丙酮,2 mL正己烷,于快速混匀器上振荡3min,离心,用尖嘴吸管将上层清液移入另一试管中,基层残渣再用正己烷(每次2 mL)提取2次,归并提取液,用氮气吹至近干,插手少量无水硫酸钠,用2mL无水乙醚分3次将残余物转移入具塞罗面试管中,插手0.8 mL 的正戊基溴化镁乙醚溶液(2.0 mol/L), 快速振荡1 min,安排30min,于冷水浴中缓缓插手5 mL0.5 mol/L的硫酸溶液撤除过量的正戊基溴化镁,再插手5 mL水,用6 mL正己烷分3次提取,归并提取液,用氮气吹至约1mL。
  将Envi-Carb活性碳固相萃取柱和Florisil固相萃取柱用树脂连讨论上下毗连起来,上面为活性碳小柱(其上包围约1 cm厚无水硫酸钠),先用6mL乙醚正己烷殽杂液(5+95,V/V)预淋洗,活化小柱,然后将上述衍生化浓缩液上样,用6mL乙醚正己烷殽杂液(5+95,V/V)洗脱。洗脱液用氮气吹至近干,用GPC活动相定容至0.5 mL,供GPC-GC/MS说明。尺度溶液用氮气吹干溶剂后,插手2 mL无水乙醚,按上述同样要领衍生、提取和净化。
  2. 功效与接头
  2.1 前处理赏罚要领的选择
  有机锡化合物常用的提取试剂有甲醇、丙酮等极性溶剂[4,5]和正己烷等非极性溶剂[6,7]。因为有机锡化合物一样平常具有较强的极性,当行使非极性溶剂提取时,常插手环庚三烯酚酮(tropolone)[8,9]、二乙基二硫代甲酸钠(DDTCNa)[10~12]或恰当浓度的酸(如HCl、HBr等)[8,11,13,14],以进步提取服从。本尝试在样品中插手盐酸,用丙酮-正己烷殽杂溶剂举办提取,要领简朴,快速,提取服从高。尝试较量了差异的盐酸浓度(0.0mol/L,0.1 mol/L,1.0 mol/L和5.0 mol/L)对各有机锡化合物提取服从的影响,功效发明,插手低浓度的盐酸溶液(0.0mol/L和0.1 mol/L)时,各有机锡化合物的提取服从较低,插手1.0 mol/L和5.0 mol/L的盐酸溶液时的提取结果均较好,因此我们选择1.0mol/L的盐酸溶液。
  因为茶叶中含有较多的色素,因此在样品净化进程中需行使一根活性碳小柱以撤除色素。对付其余的滋扰物质,我们较量了Alumina-N固相萃取柱、Florisil固相萃取柱和LC-Si固相萃取柱的净化结果,功效发明Florisil固相萃取柱的净化结果最好。以是,我们最终回收Envi-Carb活性碳固相萃取柱串联Florisil固相萃取柱作为净化本领,再团结在线凝胶色谱的进一步净化,去除了大部门基质滋扰,使得我们在检测功效时能有很好的迅速度。
  2.2 GPC-气相色谱-质谱说明
  在线GPC-GC/MS是将GPC净化体系与GC/MS说明检测在线毗连起来,实现了从样品净化到说明检测的自动化。样品提取液颠末GPC色谱柱的疏散,通过阀切换,倾轧从GPC色谱柱洗脱快的油脂、色素等滋扰组分,将方针说明物切入GC,经GC色谱柱疏散后,在MS部举办检测。切入GC/MS的起止时刻对付GPC的净化结果以及说明检测的迅速度有重要相关。假如切入的起始时刻过早或切入的竣事时刻过迟,则进入GC/MS体系的滋扰物质增多,不只倒霉于检测,并且对GC色谱柱以及MS体系倒霉。反之,假如切入的起始时刻过迟或切入的竣事时刻过早,固然进入GC/MS的滋扰物质镌汰,但也许导致切入GC/MS的方针说明物的量镌汰,从而丧失检测的迅速度。我们通过尝试,确定将GPC4.14~5.74 min时刻段的淋出液切入GC/MS体系,既确保有机锡化合物所有进入GCMS说明体系,又最大限度地操作了GPC净化的浸染。
  2.3 尺度曲线与检出限
  取必然量的6种有机锡化合物的尺度殽杂溶液,用氮气吹干溶剂后,按2.4所述要领衍生、提取和净化后,用GPC活动相定容,并配制成质量浓度为0.01~1.0mg/L的衍生化尺度事变溶液,举办GPC-GC/MS说明,尺度溶液的GC/MS色谱图见图1。以各衍生物的定量离子(定量离子和定性离子及其相对品貌见表1)的峰面积(A)对它们的质量浓度(C,mg/L)绘制尺度曲线,并求得直线回归方程和相相关数,功效见表l。
  在定量计较进程中,因为样品基质中的碎片离子也许与被测化合物的基蜂存在滋扰,因此,为了担保定量的精确性,我们选择没有滋扰或滋扰最小的碎片离子作为定量离子。在定性确证时,被测物选择离子的相对品貌该当与浓度相等的尺度事变溶液同等。定性离子相对品貌应承的毛病为:相对品貌>50%时,应承的相对毛病为±10%;相对品貌范畴在20%~50%、10%~20%和<10%时,应承的相对尺度偏不同离为±15%、±20%和±50%。
  2.4 要领的检出限、接纳率和慎密度
  要领的检出限按照10倍信噪比来确定(见表1)。本要领回收尺度插伎俩,取毁坏匀称的茶叶样品,精确插手6种有机锡化合物的殽杂尺度溶液,别离制备添加浓度为0.01、0.05和0.1
  mg/kg的样品,按2.4所述要领举办样品处理赏罚,并举办GPC-GC/MS说明,每个添加程度一再测定6次(空缺样品及添加样品GC/MS色谱图见图2),计较均匀接纳率和相对尺度毛病,功效见表2。由表2可见,要领的接纳率为66.2~105.6%,相对尺度毛病在2.7~10.4%之间,满意检测的要求。
  3. 结论
  本尝试回收在线凝胶色谱串联气相色谱-质谱(GPC-GC-MS)技能,团结概略积进样,成立了一个迅速、快速、轻盈、重现性好的有机锡化合物的检测要领。该要领的慎密度、精确度均切合要求,可用于茶叶中有机锡化合物的快速检测。



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作者:admin 来源:网络收集 发布时间:2016年04月05日