【择要】在pH8.6的TrisHCl缓冲溶液中，六偏磷酸钠使天青B在溶液中产生聚积溶液由天蓝色逐渐变为紫色，系统的吸光度低落，光散射加强。在优化前提下，在6.0×10-7～1.0×10-5mol/L范畴内，天青B在602nm处的吸光度低落与六偏磷酸钠浓度呈精采的线性相关，检出限(3σ)为5.3×10-7mol/L。对浓度为5.0×10-6mol/L的六偏磷酸钠溶液平行测定11次，其相对尺度毛病为2.5%。本要领用于饮料中添加剂六偏磷酸钠含量的说明，均匀尺度插手接纳率为99.5%～112.3%，可实现六偏磷酸钠的可视化半定量检测。
【要害词】紫外可见分光光度法，光散射，天青B，六偏磷酸钠
1弁言
品格改造剂是一类通过保水、粘结、增塑、稠化、增溶及改进流变机能等浸染以改造食物的组织布局和口感的添加剂[1]。六偏磷酸钠是常用的食等第品格改造剂，可用作水分保持剂、品格改善剂、pH调理剂等[2]。因为六偏磷酸钠中含有微量的杂质元素，如砷、铅及氟化物等，无论是单独行使照旧与其余磷酸盐配制成复合磷酸盐行使，都应切合国度尺度[3]，并且要留意钙与磷的比例[4]，以免产生因钙、磷不服衡或滥用磷酸盐，对人体康健发生不良影响。
今朝，测定磷酸盐添加剂的要领有离子色谱法[5]、原子接收光度法[67]和沉淀法等[3]。但离子色谱法所用试剂种类多，原子接收光度法和沉淀法都是间接测定磷酸盐或聚磷酸盐的含量，3种要领均操纵繁琐。本研究表白，在TrisHCl缓冲溶液(pH8.6)中，六偏磷酸钠使天青B(AB)产生聚积，导致其在602nm处的吸光度值降落，360nm阁下光散射加强，并在530nm处呈现新的散射峰。按照其吸光度低落值与六偏磷酸钠浓度在必然范畴内呈线性相关，成立了饮料中添加剂六偏磷酸钠含量测定的分光光度要领。与间接法对比，此法线性范畴宽，所用试剂种类少，操纵简朴，说明速率快，且因为跟着六偏磷酸钠浓度增进，系统由天蓝色逐渐向紫色转变，可以实现可视化半定量检测六偏磷酸钠。此要领合用于某些茶饮料和行为饮料中六偏磷酸钠添加剂含量的测定。
2尝试部门
2.1仪器与试剂
U3010型紫外可见分光光度计，F4500型荧光分光光度计，COOLPIX4500型数码相机(日今日立公司);MVS1型旋涡殽杂器(海门市其林贝尔仪器制造有限公司)。
1.0×10-4mol/L六偏磷酸钠溶液：精确称取六偏磷酸钠(广东台山化工场)6.1mg溶于水中，定容至100.0mL;1.0×10-4mol/L天青B(AB新中化学厂)溶液：精确称取3.1mg天青B溶于水中，定容至100.0mL并避光生涯;TrisHCl缓冲溶液。其余试剂均为说明纯，水为二次蒸馏水。
2.2尝试要领
精确移取1.0mLTrisHCl缓冲溶液(pH8.6)于10.0mL比色管中，插手2.5mLAB溶液，充实混匀，再插手适量六偏磷酸钠尺度或样品溶液，用水定容至5.0mL，混匀，以水为参比，在紫外可见分光光度计上扫描回响系统的接收光谱，在F4500型荧光分光光度计上扫描系统的散射光谱。
3功效与接头
3.1光谱特性
图1为系统的紫外可见接收光谱。六偏磷酸钠在400～750nm波长范畴内无接收。而阳离子染料AB在可见光区的最大接收波长为602nm。图1系统的紫外可见接收光谱
a→f天青B(AB)5.0×10-5mol/L;六偏磷酸钠(NaPO3)6(μmol/L)a0;b2.0;c4.0;d6.0;e8.0;f10.0.TrisHCl(pH8.6).向AB溶液中插手六偏磷酸钠溶液后，溶液颜色变浅，而且跟着六偏磷酸钠浓度的增进，溶液由天蓝色逐渐向紫色转变，602nm处的吸光度低落。在必然浓度范畴内，系统在602nm处的吸光度低落值与六偏磷酸钠的浓度呈线性相关。值得留意的是在500nm处呈现一个新的接收峰而且对应于530nm处呈现了一个等色点。
3.2回响前提的选择
考查了BR缓冲溶液、HClCH3COONa缓冲溶液和TrisHCl缓冲溶液对AB六偏磷酸钠回响系统的影响。功效表白，AB与六偏磷酸钠在碱性前提下回响更迅速，并且颜色变革更明明;但碱性太强，肉眼可调查到AB自聚积成沉淀，从而影响测定。BR缓冲溶液中含有PO3-4，也许影响测定。综合较量，选择ΔA值相对大的TrisHCl缓冲溶液(pH8.6)。尝试表白，AB与六偏磷酸钠回响系统在室温下20min后不变，稳按时刻至少2h。因此尝试选择在20min后测定。
3.3天青B与六偏磷酸钠的团结比
用摩尔比法和持续等摩尔变革法测定了天青B与六偏磷酸钠的团结比功效别离如图2和3所示，两种要领得出天青B与六偏磷酸钠的团结比为4∶1。
保持天青B和六偏磷酸钠的总浓度为5.5×10-5mol/L，同时改变二者各自的浓度(totalconcentrationofABand(NaPO3)6waskeptat5.5×10-5mol/LbychangingtheconcentrationofbothABand(NaPO3)6simultaneously.TrisHCl(pH8.6);λ=602nm。3.4回响机理切磋
AB在水溶液中存在自聚积征象，当溶液中的离子强度增进时，AB可以产生J型和H型聚积[8]。六偏磷酸钠的布局式呈环状，其阴离子带6个单元的负电荷，可以与带正电荷的AB通过静电浸染团结，一方面也许由于AB分子所带电荷产生改变而形成聚积体;另一方面也也许形成AB与六偏磷酸钠形成某种异质杂化体，从而引起溶液颜色的改变[9]。从图1接收光谱可见，500nm新峰和530nm等色点的呈现声名在六偏磷酸钠的浸染下，有新物质型体天生[10]。图4的散射光谱中，530nm处新的散射峰源于500nm处的接收[11]，声名新物质的颗粒较大[12]。
理论上，AB与六偏磷酸钠浸染的摩尔比应为6∶1，但图2和图3功效声名AB与六偏磷酸钠的最佳团结比为4∶1。展望也许的缘故起因是二者结适时存在空间位阻和AB分子上的正电荷存在离域性[1314]使得正电荷可以离域到S原子和N原子上，造成电荷密度减小。另外，本尝试是在弱碱性前提下举办，AB分子的正电荷被中和了一部门。以上浸染导致AB与六偏磷酸钠的最佳团结比为4∶1。
3.5共存物质的滋扰
在优化前提下，约50μmol/LAB，5.0μmol/L六偏磷酸钠时，测定了常见的和饮料中也许存在的物质对系统的影响。尝试表白，4000倍的NaCl1000倍的Na2CO3、Na2C2O4、NaH2PO4、K2HPO4、NaHCO3、柠檬酸钠500倍的KBr50倍的NaF、VitaminC40倍的Na3PO4、MgCl24倍的Na5P3O102倍的CuSO40.8倍的Pb(NO3)20.1倍的Fe2(SO4)3不滋扰测定。按照国标[3]，食物添加剂六偏磷酸钠指标中铁(Fe)和重金属(以Pb计)的应承含量很是低，因此现实测按时不需加遮蔽剂遮蔽Pb2 和Fe3 。
3.6校正曲线、慎密度及迅速度
按尝试要领，在优化前提下，发明系统在602nm处吸光度的低落(ΔA)与六偏磷酸钠的浓度在6.0×10-7～1.0×10-5mol/L范畴内呈线性相关。线性回归方程为：ΔA=-0.067c-0.0073，r=-0.9987。对5.0×10-6mol/L六偏磷酸钠溶液平行测定11次，其相对尺度毛病为2.5%。检出限为5.3×10-7mol/L。表1样品说明功效及接纳尝试
3.7样品说明及可视化半定量检测
按照《中华人民共和国食物卫生法》和《食物添加剂卫生打点步伐》，食物添加剂六偏磷酸钠在碳酸饮料、图5可视化检测差异浓度的六偏磷酸钠
Fig.5Visualdetectionof(NaPO3)6withdifferentconcentrations
六偏磷酸钠(NaPO3)6(μmol/L)a0;b4.0;c5.0;d6.0;e8.0;f10.0;g4.7(sample).天青B(AB)5.0×105mol/L;TrisHCl(pH8.6)。行为饮料中的最大行使量为1.0g/kg，茶饮料中的最大行使量为0.5g/kg。按2.2项的要领测定了1种行为饮料和3种茶饮料中六偏磷酸钠添加剂的含量。尝试表白，4种饮料中的六偏磷酸钠都没有超标;同时举办尺度插手接纳率尝试，功效见表1。应用本要领测定饮料中六偏磷酸钠添加剂含量的功效令人满足。
图5为差异浓度的六偏磷酸钠溶液的可视化测定。从a到f，六偏磷酸钠尺度溶液的浓度依次递增，可以调查到溶液由天蓝色逐渐向紫色转变。g是茶饮料3，肉眼可见其颜色介于b(4.0μmol/L)和c(5.0μmol/L)之间，在紫外可见分光光度计上测得的浓度为4.7μmol/L。尝试证明，可以通过这种简朴的要领实现六偏磷酸钠的可视化半定量检测。
相关标准：GB 8537-2008 饮用天然矿泉水