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牛乳中卵白质的提取与判断

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 一、目标

进修从牛乳中制备酪卵白的道理和要领。

二、道理

牛乳和羊乳中含富厚的卵白质,个中首要是酪卵白。酪卵白在羊乳罩中约占总卵白量3/4,牛乳中约占总卵白量的5/6。酪卵白是一种含磷卵白的不均一殽杂物。

卵白质在其等电点pH 溶液中消融度降底。按照这个道理,将牛乳的PH调解至4.8,即酪卵白的等电点时,酪卵白即沉淀出来。用乙醇撤除酪卵白沉淀中不溶于水的脂肪,获得纯的酪卵白。所得酪卵白供定性判断。

撤除酪卵白的滤液中,尚含有球卵白,清卵白等多种卵白质。

试剂

1、醋酸钠缓冲液(0.2M pH4.6)。

2、米伦(Millon)试剂:将汞100g 溶于140ml(比重1.42)的浓硝酸中(在透风橱内举办)。然后加两倍量的蒸馏水稀释。

3、95%乙醇

.5、10%NaGl.

6、0.5%NaGO

7、0.1NaON

8、0.2%HC1.

9、饱和氢氧化钙[Ca(OH)]

10、5%醋酸铅

三、操纵

(一)酪卵白的制备取奇怪牛乳100ml,放入250 ml 烧杯中加热至40℃.插手100ml 加热至同样温度的醋酸缓冲液,一边加一边动摇,并用pH为4.7(用1%NaOH 或10%醋酸举办调解)。冷却至室温,继承安排5 分钟,然后用细纱布或滤纸过滤。滤液为乳清保存以下做判断。过滤所得沉淀物,用少量蒸馏水洗屡次,过滤。将洗净的沉淀物悬浮在约30ml 乙醇中,

用布氏漏斗抽滤。所得沉淀用乙醇和等量殽杂液洗涤两次,抽干。最后用50ml 洗一次并抽干。取出抽干的粉状物,摊开在外貌皿上, 使完全挥发。称其干重计较其产量。

(二)酪卵白的性子判断

1.消融度:取试管6 支,别离加水、10%氯化钠、0.5%氯化钠,0.1N 氢氧化钠、0.2%盐酸及饱和氢氧化钙溶液各2ml。于每管中插手少量酪卵白。不绝摇荡,调查并记录各管中的酪卵白消融度。

2、米伦回响1:取酪卵白少许,安排于试管中。插手1ml 蒸馏水,再插手米论试剂10 滴,振摇,并缓缓加热。调查其颜色变革。

3、含硫(胱氨酸、半胱氨酸和蛋氨酸)测定:取少量酪卵白溶于1ml0.1N NaOH 溶液中,再插手1-3 滴5%醋酸铅,加热煮沸,溶液变为玄色。

(三)乳清中可凝固性卵白质的判断将制备酪卵白时所得的滤液移入烧杯中,缓缓加热。即呈现卵白质沉淀。此为乳清中的球卵白和清卵白。注附:米伦回响是因为卵白质分子中有羟基苯基(-CH-OH)存在之故.一些在3.5 位置上没有代替基的酚类化合物,譬喻酪氨酸、酚及廱香酚也呈阳性回响。在卵白质分子中,只有酪氨酸才具有羟基苯基,以是卵白质对米伦试剂起阳性回响。


作者:admin 来源:网络收集 发布时间:2016年02月25日