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糖酵解中间产品的判断

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一、尝试目标
相识糖酵解进程的某一中间步调及操作克制剂来研究中间代谢的要领。

二、尝试道理
操作碘乙酸对糖酵解进程中3-磷酸苷油醛脱氢酶的克制浸染,使3-磷酸苷油醛不再向前变革而蕴蓄。硫酸肼作为不变剂,用来掩护3-磷酸苷油醛是不自发解析。然后用2,4-二硝基苯肼与3-磷酸苷油醛在碱性前提下形成2,4-二硝基苯肼-丙糖的棕色复合物,其棕色水平与2-磷酸苷油醛含量成正比。

三、仪器 质料和试剂
(1)仪器:试管(1.5×1.5cm)、吸量管(1ml、、2ml3ml)、恒温水浴、烧杯(50ml)。
(2)质料:奇怪酵母。
(3)试剂:
①2,4-二硝基苯肼:0.1g2,4-二硝基苯肼溶于水100ml 2mol/L盐酸溶液中,贮于棕色瓶中备用。
②0.56mol/L硫酸肼溶液:称取7.28g硫酸肼溶于50ml水中,这时不会所有消融,当插手NaOH使pH达7.4时则完全消融。此液也可用于水合肼溶液配制,可按其分子浓度稀释至0.56mol/L,此时溶液呈碱性,可用浓硫酸调pH至7.4即可。
③5%葡萄糖溶液。
④10%三氯乙酸溶液。
⑤0.75mol/LNaOH溶液。
⑥0.002mol/L碘乙酸溶液。

四、操纵步调
(1)取小烧杯3只,别离插手奇怪酵母0.3g,并按下表别离插手各试剂,混匀。
杯号 5%葡萄糖插手量/ml 10%三氯醋酸插手量/ml 碘乙酸插手量/ml 硫酸肼插手量/ml 发酵时起泡几多

1 10 2 1 1  

2 10 -- 1 1  

3 10 -- -- --  

(2)将各杯殽杂物别离倒入编号沟通的发酵罐内,放入37℃保温1.5h,调查发酵管发气愤泡的量有何差异。
(3)把发酵管中发酵液倾倒入同号小烧杯中并在2号和3号杯中按下表补加各试剂,摇匀放10min后和第一只烧杯中内容物一路别离过滤,取滤液举办测定。

杯号 10%三氯乙酸/ml 碘乙酸/ml 硫酸肼/ml

2 2 -- --

3 2 1 1

(4)取3个试管,别离插手上述滤液0.5ml,并按下表插手试剂和处理赏罚。


管号
滤液/ml 0.75mol/L
NaOH/ml

室温安排
10min 2,4-二硝基苯肼/ml

38℃水浴保温19min 0.75mol/L
NaOH/ml
调查功效

1 0.5 0.5 0.5 3.5  

2 0.5 0.5 0.5 3.5

3 0.5 0.5 0.5 3.5


五、思索题
尝试中哪一发酵管天生的气泡最多?哪一管最后天生的颜色最深?为什么?


作者:admin 来源:网络收集 发布时间:2016年01月31日
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